MetaClass Cariotipador - FISH

Sistema MetaClass Cariotipador y FISH

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Sistema modular con Cariotipador y FISH para estudio de citogenética humana.

Consiste en los siguientes módulos independientes:

MetaClass Cariotipador

MetaClass FISH

MetaClass Base de datos

Más información:

MetaClass Cariotipador

Analisis con MetaClass Cariotipador

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Permite obtener el cariotipo de una muestra a través de la captura de una serie de imágenes de la metafase. El citogenetista puede observar cualquier cambio en los cromosomas. Cada cromosoma se colocará por pares de acuerdo con su tamaño, la posición de los centrómeros y la disposición de las bandas visualizadas.

El sistema proporciona una excelente morfología y calidad de las bandas de cromosomas.

Como resultado final, se obtiene un informe personalizado.

El cariotipo se analiza en microscopía de campo claro. Con el objetivo 100X
Se pueden capturar varias imágenes de la metafase
El umbral se puede modificar para mejorar la calidad de la imagen
Clasificación automática de los cromosomas
El modulo ofrece 3 vistas en la pantalla: La vista de la metafase, cariotipo y cromosomas no clasificados que se marcan con un 0
Se puede mostrar el prototipo del cromosoma
Los cromosomas no clasificados se pueden corregir de forma automática o manualmente de:
– Superposición:  Cuando un cromosoma aparece superpuesto con otro, en una parte.
– Separación: Cuando dos cromosomas están juntos en un extreme, se pueden separar.
– Cruces
– Enderezar
– Rotación
– Voltear un cromosoma
– Obtener la imagen especular, así como la magnificación de los cromosomas individuales.
– El brillo y contraste se pueden modificar.
– Las bandas dañadas de los cromosomas se pueden señalizar en el cariotipo
Se pueden guardar las sesiones *mtc y las imágenes * bpm.
Se pueden seleccionar cromosomas individuales y exportarlos al Gestor de muestras (Metaclass Base de datos) para añadir comentarios en los resultados e imprimir el informe.

Cariotipo con Síndrome de Down (trisomía 21)

Cariotipo con Síndrome de Down (trisomía 21)

Esta es la anomalía cromosómica más común en neonatos. Se caracteriza por tener un cromosoma 21 extra, y se escribe de la siguiente manera: 47, XY,+21

A continuación la descripción del cariotipo:

47:  El número total de cromosomas (46 es lo normal).

XY:  Los cromosomas sexuales (masculino).

+21: Designa el cromosoma 21 extra.

Cariotipo con Delección en el cromosoma 7

Cariotipo con Delección en el cromosoma 7

Este cariotipo es un ejemplo de una delección simple de un cromosoma. En este caso, un segmento en el brazo q, o largo, del cromosoma derecho 7 está ausente. En este ejemplo particular hay dos roturas microscópicas visibles que muestran la delección instersticial. Si hubiera existido una rotura como resultado de la pérdida de la parte final del cromosoma, ésta se conoce como delección terminal. El Cariotipo se escribe como: 46,XY, del(7) (q11.23q21.2).

A continuación la descripción del cariotipo:

46:  El número total de cromosomas.

XY:  Los cromosomas sexuales (masculino).

del(7):  delección en el cromosoma 7.

(q11.23q21.2):  puntos de rotura del segmento ausente.

MetaClass FISH

Análisis con MetaClass FISH

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Módulo de análisis para obtener la imagen Fluorescent IN SITU Hybridization (FISH).

Las imágenes de fluorescencia capturadas de muestras hibridadas con varias sondas de ADN, permiten confirmar anomalías genéticas o cromosómicas, tales como trisomías, microdelecciones o algunas reordenaciones cromosómicas.

Las imágenes de FISH  se analizan con microscopía de fluorescencia,  con el objetivo 100X oil
Se capturan varias imágenes con diferentes filtros. Las imágenes son originalmente en b/n para finalmente obtener una única imagen resultante que muestra la presencia o ausencia de la señal.

Ejemplo FISH 1          Ejemplo FISH 2

Este es un ejemplo del Screen test de Aneuplodía, donde núcleos de células del líquido amniótico en interfase se han combinado con varias sondas de ADN para los cromosomas 13,18,21, X e  Y. El núcleo de la izquierda ha sido hibridado con sondas para el cromosoma 13 (green), y 21 (red). El núcleo de la derecha se ha hibridado con sondas para el cromosoma 18 (aqua), X (green), e Y (red). Hay dos señales para cada uno de los cromosomas 13,18 y 21 y una señal para el X y una para la Y. Por lo tanto, en lo referido al Screen test de Aneuploidía, este es un feto normal de sexo masculino.

Ejemplo FISH 3          Ejemplo FISH 4

El test de Aneuploidía muestra un feto de sexo femenino con trisomía 21. El núcleo de la izquierda se ha hibridado con sondas para el cromosoma 13 (green), y 21 (red) y muestra claramente 3 señales. El núcleo de la derecha se ha hibridado con sondas para los cromosomas 18 (aqua), X (green) e Y (red). Como muestra dos señales verdes y ninguna roja se trata de un feto femenino.

Ejemplo FISH 5

Este es un ejemplo de metafase celular que ha sido hibridado con una sonda para el síndrome Shprintzen ShDiGeorge/Velo-Cardio-Facial/CATCH 22/, causada por una microdelección en el cromosoma 22. En este caso particular, la sonda es una mezcla de dos colores para el cromosoma 22. La señal verde es un control interno y se localiza en el 22q13. Permite la rápida identificación de los dos cromosomas 22. La señal roja se localiza en la región DiGeorge 22q11.2. En este caso en particular, los dos cromosomas 22 muestran la señal roja, no hay microdelección en el region DiGeorge y por lo tanto no presenta el síndrome DiGeorge.

MetaClass Base de datos

Gestión de muestras con MetaClass Base de datos

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Base de datos integrada que se puede instalar con cualquiera de los módulos arriba descritos, permite almacenaje de los datos de los pacientes y acceso fácil a los resultados finales e informes.

El módulo incluye informes personalizados en cualquier idioma.

Información adicional

Modelo: Basler Ace acA1300-200uc
Conexión: USB 3.0
Cable de la cámara: USB 3.0
Tarjeta: USB 3.0 – PCI
PC de sobremesa o portátil: Sistema operativo Windows 10 (32 o 64 bits)
Procesador: Intel Core i5 o superior
Memoria RAM: 4 GB o superior
Puerto USB 3.0
Modelo recomendado: HP ProDesk 600 (PC) o Toshiba Tecra A50 (Portátil)
Marcas de microscopio: Nikon, Olympus, Zeiss o Leica
Configuración: Triocular rosca-c 0.7x (recomendado) o 1x
Cariotipador:
– Método de observación: campo claro
– Objetivo: 100x oil
– Filtro: GIF (Verde)
FISH:
– Método de observación: Fluorescencia
– Objetivo: 100x oil
– Filtro: Varios filtros de fluorescencia, según la sonda de ADN utilizada
Configuración de fluorescencia: Módulo de Epifluorescencia, Lámpara y adaptadores.
Filtros de fluorescencia

La citogenética es el estudio de los cromosomas y las enfermedades causadas por la existencia de un número o estructura anormales de los mismos.

Los cromosomas son estructuras complejas situadas en el núcleo de las células. Se componen de ADN, que está superenrrollado con proteínas llamadas histonas que soportan la estructura, proteínas no histónicas, RNA y polisacáridos.

Durante el proceso de mitosis, los 23 pares de cromosomas humanos se condensan lo suficiente como para hacerse visibles en campo claro con un objetivo 100x. Los cromosomas se exponen a un inhibidor que bloquea la formación del aparato microtubular y detiene la división celular en la etapa de la metafase.

Se pueden utilizar varios tipos de tejidos para la preparación de cromosomas. Ejemplos: sangre periférica, médula ósea, liquido amniótico y otros productos de la concepción. A pesar de que las técnicas difieren un poco según el tejido utilizado, el método básico de obtención de la preparación de cromosomas para el estudio del cariotipo se explica a continuación:

Cultivo celular (alimentación y mantenimiento)

Adición de un inhibidor de la mitosis para detener el crecimiento celular en la metafase

Cultivo celular: incluye exponer las células a un medio hipotónico y a continuación una serie de soluciones de fijación. Esto permite a las células expandirse para que los cromosomas queden visibles.

Tinción de la muestra. El colorante tiñe las regiones de los cromosomas que son ricas en Adenina (A) y Timina (T), mostrando una banda oscura.

Fluorescent IN SITU Hybridization (FISH) es una técnica que utiliza sondas de ADN fluorescentes para detectar o confirmar anomalías cromosómicas. La muestra de ADN (de cromosomas en metafase o núcleos en interfase) se desnaturaliza, separando así las cadenas complementarias de la estructura de doble hélice del ADN.

Se añade entonces la sonda de fluorescencia a la mezcla de muestra desnaturalizada que se hibrida con la muestra de ADN en la diana. La señal de  la sonda se puede ver mediante microscopía de fluorescencia y marcar como presencia o ausencia de señal.

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Galería de imágenes

Vídeo